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Elisa試劑盒標(biāo)本的保存要求及處理方法
點(diǎn)擊次數(shù):1246 更新時(shí)間:2020-04-26
      一、Elisa試劑盒的保存要求:
  對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,*-70℃凍存?zhèn)溆谩?/div>
  二、Elisa試劑盒的常見(jiàn)液體標(biāo)本的處理方法:
  液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
  ①血清:室溫血液自然凝固0-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
 ?、谀蛞海河脽o(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
 ?、劢M織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
  三、標(biāo)本處理注意事項(xiàng):
  ().均質(zhì):
 ?、俳M織樣本:肉、肝食品類切細(xì),用絞肉機(jī)反復(fù)絞碎,混合均勻。
 ?、谒a(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細(xì),用均質(zhì)器均漿;原料表面較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
 ?、鄣邦悾乎r蛋去殼,蛋黃和蛋白充分混勻。
 ?、芩?、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除去表面的水分,取食用部分。
 ?。?).振蕩提?。?/div>
  將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中,振蕩,使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充分接觸以深入到樣本組織內(nèi)部,提取待測(cè)組分。
 ?、僬袷幏绞剑赫袷幤魃线M(jìn)行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。
  ②在組織樣本中加入有機(jī)溶劑之間提取時(shí),應(yīng)邊加邊振蕩,防止組織凝結(jié)成團(tuán),不利于提取。
  (3).乳化現(xiàn)象:
  在用有機(jī)溶劑提取過(guò)程中,如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,解決的方法有:
  ①用細(xì)頭輕輕的攪拌,破壞乳化后,再重復(fù)離心。
  ②再加入適量的提取劑,重新振蕩。注意離心后要保證樣本的稀釋倍數(shù)不變。
 ?。?).濃縮:
  由于凈化過(guò)程中引入的溶劑,可能會(huì)降低待測(cè)組分的濃度或者不適宜直接分析,需要去除全部有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈桑儆脧?fù)溶液溶解干燥殘留物。
  濃縮方式:氮?dú)獯蹈沙s、壓縮空氣吹干除雜。
  請(qǐng)注意:
 ?、僭诖蹈蓸颖局?,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)干擾。
 ?、谠诖禈颖緯r(shí),針頭應(yīng)在液面上空,避免與樣本接觸,防止產(chǎn)生交叉污染。
 ?、蹣颖敬蹈珊髴?yīng)立即取下,避免吹的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),影響*終檢測(cè)結(jié)果。
 ?、懿煌乃幬?,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。
 ?。?).凈化:
  經(jīng)過(guò)提取的待測(cè)組分中通常含有一些會(huì)干擾試劑盒中抗原抗體反應(yīng)的雜質(zhì)或者是含有與待測(cè)物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測(cè)組分與雜質(zhì)分離的過(guò)程,我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的常見(jiàn)的凈化是:液液分配法。

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